微生物檢測的必要性
1、食品
食品因含有微生物可依賴生長的營養成分,因此食品會受到微生物不同程度的污染。食品質量安全關系到人民群眾的身體健康,生命安全及社會經濟。為了食品的安全,人們的健康,微生物檢測極其必要。
2、醫院
醫院感染都和微生物有著極為密切的關系。加強醫院的微生物檢驗與監測,對于預防和控制醫院感染起著十分重要的作用。
3、空氣
室內空氣是微生物污染的重要傳播途徑。室內舒適的溫度,濕度等環境條件以及相對密閉的室內更為各種有害微生物滋生創造了條件。只有有效地檢測微生物的含量,才能采取有效地措施,才能保證人體健康不受微生物的危害。
微生物檢測方法
1、計數器測定法
即用血細胞計數器進行計數。取一定體積的樣品細胞懸液置于血細胞計數器的計數室內,用顯微鏡觀察計數。由于計數室的容積是一定的(0.1mm3),因而根據計數器刻度內的細菌數,可計算樣品中的含菌數。本法簡便易行,可立即得出結果,不僅適于細菌計數,也適用于酵母菌及霉菌孢子計數。
2、電子計數器計數法
電子計數器的工作原理是測定小孔中液體的電阻變化,小孔僅能通過一個細胞,當一個細胞通過這個小孔時,電阻明顯增加,形成一個脈沖,自動記錄在電子記錄裝置上。該法測定結果較準確,但它只識別顆粒大小,而不能區分是否為細菌。因此,要求菌懸液中不含任何碎片。
3、活細胞計數法
常用的有平板菌落計數法,是根據每個活的細菌能長出一個菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液,作一系列的倍比稀釋,然后將定量的稀釋液進行平板培養,根據培養出的菌落數,可算出活菌數。此法靈敏度高,是一種檢測污染活菌數的方法,也是目前國際上許多國家所采用的方法。使用該法應注意:
①一般選取菌落數在30~300之間的平板進行計數,過多或過少均不準確;
②為了防止菌落蔓延,影響計數,可在培養基中加入0.001%的2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC);
③本法限用于形成菌落的微生物。廣泛應用于水、牛奶、食物、藥品等各種材料的細菌檢驗,是Z常用的微生物檢測方法。
4、比濁法
比濁法是根據菌懸液的透光量間接地測定細菌的數量。細菌懸浮液的濃度在一定范圍內與透光度成反比,與光密度成正比,所以,可用光電比色計測定菌液,用光密度(OD值)表示樣品菌液濃度。此法簡便快捷,但只能檢測含有大量細菌的懸浮液,得出相對的細菌數目,對顏色太深的樣品,不能用此法測定。
5、測定細胞重量法
此法分為濕重法和干重法。濕重法系單位體積培養物經離心后將濕菌體進行稱重;干重法系單位體積培養物經離心后,以清水洗凈放人干燥器加熱烘干,使之失去水分然后稱重。此法適于菌體濃度較高的樣品,是微生物檢測的一種常用方法。
6、測定細胞總氮量或總碳量
氮、碳是細胞的主要成分,含量較穩定,測定氮、碳的含量可以推知細胞的質量。此法適于濃度較高的微生物檢測。